质量控制体系
  细胞培养技术
  微载体技术
  质量控制体系
 

成大速达的生产工艺
* 不同工艺收获的病毒液小鼠滴度:

    这里是生物反应器、转瓶、细胞工厂等3种工艺流程病毒收获液小鼠滴度比较。

    从图中可以看出,利用生物反应器微载体高密度悬浮培养收获的病毒滴度,比其他生产工艺高10倍以上,而且生物反应器工艺可以连续高滴度收获20天。因为单位体积内有效抗原含量非常高,从而保证了产品最终效价。

* 连续3批病毒收获液的小鼠滴度:

 

    这是连续3批病毒收获液的小鼠滴度比较,如图所示,接种病毒第3天开始收获病毒液,一直连续收获20天,滴度从3天的6.8逐步升高,到第10天达到高峰7.8左右,有时超过8.0,第20天降低到6.4左右,停止收获。

    从3批的小鼠滴度可以看出,先进的生物反应器工艺生产的疫苗批间差异小,质量稳定 。


成大速达?的生产控制
* 成大速达?的生产环境:
    厂房设计:由WHO专家和美国FDA专家协助设计。
    引进技术:关键生产设备及工艺流程达到世界先进水平,如生物反应器高密度培养细胞、层析纯化、无佐剂合苗
              等。
    人员培训:职业培训、GMP培训、专业技能培训。
    生产管理软件:符合中国GMP,达到WHO标准。

* 成大速达?的Vero细胞:
    原始细胞库:引进美国ATCC的P134代细胞。
    主细胞库:由原始库细胞传代至136代构建。
    工作细胞库:由主库细胞传代至138代构建。
    生产使用的细胞最多不会超过142代。

* 成大速达?毒株来源和谱系:
  图:PV-2061毒株谱系  
 

来源:美国疾病预防控制中心(CDC)
谱系:巴斯德PV2061
特征:VERO细胞适应的固定毒株
代次:第15代
被全球多个国家使用生产狂犬疫苗,证明为优良毒种。  

* 成大速达?的主要生产步骤:
    主细胞库中136代Vero细胞经过复苏,在转瓶内37℃培养,2次传代扩增至138代成为工作细胞,将扩增好的工作细胞移到生物反应器内,微载体高密度悬浮培养7天,细胞密度达到107个/毫升,这时Vero细胞不超过143代。加维持液中止细胞培养,接种巴斯德PV2061毒种,3天后开始连续收获病毒20天。测定收获的病毒液的小鼠滴度,应用全程无菌连接的澄清过滤和超滤浓缩管线浓缩10倍后,用β-丙内酯4℃灭活,安全试验通过后,进行层析纯化,有效地去除残余牛血清、细胞碎片、残余细胞DNA等杂质,使产品达到高质量的标准。

   对层析纯化收获液进行质量检定,合格后,无佐剂合苗。经过罐装、压盖、包装到成品。成品质量检定结果大于等于4.5IU,37℃2周大于等于3.0IU。冻干37℃4周大于等于2.5IU。


图:成大速达?的主要生产步骤



成大速达?的质量控制


 

* 确保细胞良好的生长:
从下图我们可以看到细胞在微载体表面生长的非常好,细胞密度达107/ml。刚才已经谈过,巴斯德PV2061狂犬病固定毒毒株是WHO公认的免疫原性高的Vero细胞适应株,因此,接种病毒后,连续收获病毒的滴度很高,这样从技术上就保证了成大速达TM 0.5ml的小剂量里面,能够含有较高的抗原蛋白和较少的杂蛋白。


图:细胞接种后,生物反应器器内微载体上的Vero细胞生长情况

* 采用先进的生产工艺:
    从前面的工艺流程中,我们已经知道,收获的病毒液必须经过无菌连接的管道化的澄清过滤和超滤浓缩后,灭活,然后,进行层析纯化。下面的图中显示先进的纯化设备和训练有素的工作人员在操纵全自动的装备,经过这道关键的工艺后,有效地去除99.95%的杂蛋白和DNA,保证了成大速达TM具有卓越的安全性。

    下面的3个图是连续3批层析纯化后收获峰:左侧峰为病毒峰,可以看出与杂蛋白峰距离很远,3批峰形稳定,收获的抗原含量高,杂蛋白低,3批的批间差异非常小,从而保障不同批次成大速达TM的都具有卓越的安全性。




* 严格的质量控制:
    除了先进的生产设备和工艺流程,我们还有高素质的质量控制人员。在外籍专家的指导下,他们对整个生产过程进行严格的质量控制。

    成大速达TM是国内唯一不仅监测抗体还用ELISA方法检测抗原含量的。


图:外籍专家正在指导技术对接




辽宁大发888成大生物股份有限公司 版权所有

互联网药品信息服务资格证:(辽)-非经营性-2013-0013
备案号: 辽ICP备05014077号